Cromatest

El Fe (II) de todas las formas de hemoglobina, con excepción de la sulfohemoglobina, es oxidado por el ferrocianuro a Fe(III) convirtiéndolas en metahemoglobina que, a la vez, reacciona con cianuro ionizado (CN-) formándose cianmetahemoglobina, un derivado muy estable que absorbe a 540 nm. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hemoglobina total en la muestra.

El método está basado en las propiedades del Cromazurol S (CAS), colorante cromogènico con alta afinidad para los iones Fe3+/Fe2+ que en condiciones ácidas en presencia de cetrimida (CTAB) forma un intenso complejo púrpura proporcional a la concentración de hierro presente en la muestra.

El Fe3+ transportado por la transferrina sérica, una vez disociado en un medio ligeramente ácido por acción del Teepol y el cloruro de guanidinio, es reducido por la acción de la hidroxilamina a Fe2+, formando el ión ferroso en presencia de FerroZine un complejo coloreado proporcional a la concentración de hierro presente en la muestra.

El Fe3+ transportado por la transferrina sérica, una vez disociado en un medio ligeramente ácido por acción del Teepol y el cloruro de guanidinio, es reducido por la acción de la hidroxilamina a Fe2+, formando el ión ferroso en presencia de FerroZine un complejo coloreado proporcional a la concentración de hierro presente en la muestra.

El Fe3+ transportado por la transferrina sérica, una vez disociado en un medio ligeramente ácido por acción del Teepol y el cloruro de guanidinio, es reducido por la acción de la hidroxilamina a Fe2+, formando el ión ferroso en presencia de FerroZine un complejo coloreado proporcional a la concentración de hierro presente en la muestra.

La lactato deshidrogenasa (LDH/LD) cataliza la reducción de piruvato a lactato (P-L) en presencia de nicotinamido adenin dinucluceótido reducido (NADH) a pH 7,5. La reacción se controla cinéticamente a 340 nm a través de la disminución de la absorbancia resultante de la oxidación del NADH a NAD+ proporcional a la actividad LDH en la muestra.

La gamma-glutamiltransferasa (g-GT) cataliza la transferencia del grupo g-glutamilo de la g-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida a la glicilglicina con la formación de L-g-glutamil-glicilglicina y 5-amino- 2-nitrobenzoato. La cantidad de 5-amino-2-nitrobenzoato formado, controlada cinéticamente a 405 nm, es proporcional a la actividad de g-GT presente en la muestra.

La gamma-glutamiltransferasa (g-GT) cataliza la transferencia del grupo g-glutamilo de la g-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida a la glicilglicina con la formación de L-g-glutamil-glicilglicina y 5-amino- 2-nitrobenzoato. La cantidad de 5-amino-2-nitrobenzoato formado, controlada cinéticamente a 405 nm, es proporcional a la actividad de g-GT presente en la muestra.

En la reacción de Trinder, la glucosa es oxidada a D-gluconato por la glucosa oxidasa (GOD), con formación de peróxido de hidrógeno. En presencia de peroxidasa (POD), el fenol y la 4- aminoantipirina (4-AA) se condensan por acción del peróxido de hidrógeno, formando una quinonaimina roja proporcional a la concentración de glucosa en la muestra.

En la reacción de Trinder, la glucosa es oxidada a D-gluconato por la glucosa oxidasa (GOD), con formación de peróxido de hidrógeno. En presencia de peroxidasa (POD), el fenol y la 4- aminoantipirina (4-AA) se condensan por acción del peróxido de hidrógeno, formando una quinonaimina roja proporcional a la concentración de glucosa en la muestra.

En la reacción de Trinder, la glucosa es oxidada a D-gluconato por la glucosa oxidasa (GOD), con formación de peróxido de hidrógeno. En presencia de peroxidasa (POD), el fenol y la 4- aminoantipirina (4-AA) se condensan por acción del peróxido de hidrógeno, formando una quinonaimina roja proporcional a la concentración de glucosa en la muestra.

En la reacción de Trinder, la glucosa es oxidada a D-gluconato por la glucosa oxidasa (GOD), con formación de peróxido de hidrógeno. En presencia de peroxidasa (POD), el fenol y la 4- aminoantipirina (4-AA) se condensan por acción del peróxido de hidrógeno, formando una quinonaimina roja proporcional a la concentración de glucosa en la muestra.