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La creatina quinasa (CK) cataliza la reacción entre la creatina fosfato (CP) y la adenosina 5´-difosfato (ADP) con formación de creatina y adenosina 5´-trifosfato (ATP), convirtiendo esta última la glucosa en glucosa-6-fosfato (G6P) en presencia de hexoquinasa (HK). La G6P es oxidada a Gluconato-6P en presencia de nicotinamido-adenin dinucleótido fosfato (NADP) reducido en una reacción catalizada por la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH). La conversión se controla cinéticamente a 340 nm a través del aumento de la absorbancia resultante de la reducción del NADP a NADPH, proporcional a la actividad de la CK presente en la muestra. En este método la inclusión de N-acetilcisteina (NAC) permite la activación óptima del enzima.

La mayor actividad de la CK en sueros normales se debe a los isoenzimas CK-MM y CK-MB presentes en los tejidos muscular y cardiaco. La CK-BB se halla por lo general presente a muy bajas concentraciones. Ambos enzimas de la creatina kinasa (CK) son dímeros formados por la asociación de dos subunidades de músculo (M) y células nerviosas (B). La immunoinhibición mediante un anticuerpo específico de ambas subunidades MM y la unidad individual de la CK-MB permite la determinación de la subunidad B. La actividad correspondiente a la mitad de la CK-MB se mide a través del aumento de la absorbancia resultante de las siguientes reacciones acopladas.

La mayor actividad de la CK en sueros normales se debe a los isoenzimas CK-MM y CK-MB presentes en los tejidos muscular y cardiaco. La CK-BB se halla por lo general presente a muy bajas concentraciones. Ambos enzimas de la creatina kinasa (CK) son dímeros formados por la asociación de dos subunidades de músculo (M) y células nerviosas (B). La immunoinhibición mediante un anticuerpo específico de ambas subunidades MM y la unidad individual de la CK-MB permite la determinación de la subunidad B. La actividad correspondiente a la mitad de la CK-MB se mide a través del aumento de la absorbancia resultante de las siguientes reacciones acopladas.

El ensayo está basado en la capacidad reductora de las cetoaminas formadas por la condensación no-enzimática entre la glucosa y las proteínas séricas (fructosaminas) para reducir en solución alcalina las sales de tetrazolio a un complejo coloreado medible fotometricamente. La sal oxidada de tetrazolio, iniciadora de la reacción, es reducida por acción de la fructosamina formando un complejo de formazan purpura.

Este procedimiento esta basado en un método enzimático mejorado diseñado originalmente para evaluar la creatinina sérica y urinaria. El ensayo se efectúa en dos etapas. En la primera la Creatina se elimina durante los primeros minutos de preincubación de la muestra con creatinasa. En la segunda etapa la adición de la creatininasa inicia la reacción hidrolizando la creatinina de la muestra en presencia de sarcosina oxidasa (Sar OD) con producción de peróxido de hidrogeno: Creatinina + H2O Creatina Sarcosina + H2O + O2 H2O2 + Glicina + HCHO El peróxido de hidrógeno derivado de la reacción oxidásica es cuantificado por una reacción de tipo Trinder en la que el derivado cromogénico HTIB y la 4-aminoantipirina (4-AA) se condensan en presencia de peroxidasa (POD) para formar un colorante rojo de quinonaimina. 4-AA + HTIB Quinonaimina + H2O La velocidad de desarrollo de color es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra.

El método está basado en la unión específica del arsenazo III y calcio a un pH ácido, con el consiguiente desplazamiento del espectro de absorción del complejo. La intensidad del cromóforo formado es proporcional a la concentración del calcio total de la muestra.

La bilirrubina directa (conjugada) reacciona con la sal de diazonio 2,4-diclorofenildiazonio (2,4-DPD) en presencia de ácido sulfámico formándose azobilirrubina, este complejo coloreado puede ser medido fotométricamente a 546 nm. De las dos fracciones de bilirrubina presentes en suero, glucuronato de bilirrubina (conjugada) y bilirrubina libre asociada a albúmina (no conjugada), sólo reacciona directamente la primera, mientras que la bilirrubina libre precisa ser disociada de la proteína por un acelerador para que reaccione. La bilirrubina indirecta se calcula por diferencia entre la bilirrubina total (con acelerador) y la directa (sin acelerador). Los conceptos «directa» e «indirecta» se refieren exclusivamente a las características de reacción en presencia o ausencia de aceleradores o solubilizantes y equivalen sólo de forma aproximada a las dos fracciones de bilirrubina citadas.

El método está basado en la unión específica del arsenazo III y calcio a un pH ácido, con el consiguiente desplazamiento del espectro de absorción del complejo. La intensidad del cromóforo formado es proporcional a la concentración del calcio total de la muestra.

El método se basa en la unión específica de la cresolftaleína complexona (OCC), un indicador metalocrómico, y el calcio a un pH alcalino, lo que produce un desplazamiento del espectro de absorción.

La colinesterasa (CHE) cataliza la hidrólisis del sustrato butiriltiocolina formando butirato y tiocolina. Esta última reduce el ácido 5,5´-mercaptobis-2-nitrobenzoico (DMNB) a 5-mercapto-2- nitrobenzoate (5-MNBA), un compuesto coloreado.La reacción se controla cinéticamente a 405 nm a partir de la velocidad de formación del color amarillo producido, proporcional a la actividad CHE en la muestra.

Este método para la determinación de colesterol total en suero se basa en el uso de tres enzimas: colesterol esterasa (CE), colesterol oxidasa (CO) y peroxidasa (POD). En presencia de este último la mezcla de fenol y 4-aminoantipirina (4-AA) se condensan por acción del peróxido de hidrógeno, formando una quinonaimina coloreada proporcional a la concentración de colesterol en la muestra.

Este método para la determinación de colesterol total en suero se basa en el uso de tres enzimas: colesterol esterasa (CE), colesterol oxidasa (CO) y peroxidasa (POD). En presencia de este último la mezcla de fenol y 4-aminoantipirina (4-AA) se condensan por acción del peróxido de hidrógeno, formando una quinonaimina coloreada proporcional a la concentración de colesterol en la muestra.