Este procedimiento esta basado en un método enzimático mejorado diseñado originalmente para evaluar la creatinina sérica y urinaria. El ensayo se efectúa en dos etapas. En la primera la Creatina se elimina durante los primeros minutos de preincubación de la muestra con creatinasa. En la segunda etapa la adición de la creatininasa inicia la reacción hidrolizando la creatinina de la muestra en presencia de sarcosina oxidasa (Sar OD) con producción de peróxido de hidrogeno:
Creatinina + H2O Creatina
Sarcosina + H2O + O2 H2O2 + Glicina + HCHO
El peróxido de hidrógeno derivado de la reacción oxidásica es cuantificado por una reacción de tipo Trinder en la que el derivado cromogénico HTIB y la 4-aminoantipirina (4-AA) se condensan en presencia de peroxidasa (POD) para formar un colorante rojo de quinonaimina.
4-AA + HTIB Quinonaimina + H2O
La velocidad de desarrollo de color es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra.
Creatinina + H2O Creatina
Sarcosina + H2O + O2 H2O2 + Glicina + HCHO
El peróxido de hidrógeno derivado de la reacción oxidásica es cuantificado por una reacción de tipo Trinder en la que el derivado cromogénico HTIB y la 4-aminoantipirina (4-AA) se condensan en presencia de peroxidasa (POD) para formar un colorante rojo de quinonaimina.
4-AA + HTIB Quinonaimina + H2O
La velocidad de desarrollo de color es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra.
