El Fe3+ transportado por la transferrina sérica, una vez disociado en un medio ligeramente ácido por acción del Teepol y el cloruro de guanidinio, es reducido por la acción de la hidroxilamina a Fe2+, formando el ión ferroso en presencia de FerroZine un complejo coloreado proporcional a la concentración de hierro presente en la muestra.