La colinesterasa (CHE) cataliza la hidrólisis del sustrato butiriltiocolina formando butirato y tiocolina. Esta última reduce el ácido 5,5´-mercaptobis-2-nitrobenzoico (DMNB) a 5-mercapto-2- nitrobenzoate (5-MNBA), un compuesto coloreado.La reacción se controla cinéticamente a 405 nm a partir de la velocidad de formación del color amarillo producido, proporcional a la actividad CHE en la muestra.